久久无码精品aV免费看I国产成人一区二区三区久久精品I免费看黄在线看Ifree×性护士I欧美精品你懂的I日韩大陆欧美高清视频区I亚洲爆乳波霸AVI国产福利av在线I欧美一二级

網站首頁技術中心 > STC-1 小鼠小腸內分泌細胞傳代/復蘇技巧
產品目錄
STC-1 小鼠小腸內分泌細胞傳代/復蘇技巧
更新時間:2024-06-11 點擊量:575

STC-1 小鼠小腸內分泌細胞

Small Intestine Endocrine Cell Line ,STC1

貨號:YJ-m055(種屬鑒定)

價格: 3000.0

規格: 1*106 

細胞介紹

STC-1細胞來源于雙重轉基因小鼠的腸腫瘤組織。含有連接大鼠胰島素基因啟動子與多瘤病毒小T抗原的融合基因與含有連接大鼠胰島素基因與SV40的基因結合產生雙轉基因小鼠。這些小鼠一般患有腸腫瘤以及胰腺β細胞瘤。STC-1細胞產生激素分泌素。

細胞特性

1 來源:腸道

2 形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3 含量:>1x10^6  細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代                       

一.培養基及培養凍存條件準備:

1 準備DMEM(推薦YJ-0001)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二.細胞處理:

1 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

STC-1 小鼠小腸內分泌細胞.png

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

實驗技術服務:


滬公網安備 31011802001677號

主站蜘蛛池模板: 精品高潮呻吟99av无码视频 | 国产精品无码专区在线观看 | 男人在线天堂 | 亚洲一区二区三区av天堂 | 成人免费午夜视频69影院 | 韩国毛片基地 | 青青久在线视频免费观看 | 色一欲一性一乱—区二区三区 | 日韩精品一区二区三区四区新区 | 中文字幕精品一二三四五六七八 | 亚洲人毛耸耸少妇xxx | 国产精品免费久久久 | 香蕉久久人人爽人人爽人人片av | 成人一级毛片 | 免费国产成人高清在线视频 | 午夜少妇一级福利 | 人成在线观看 | 狠狠色狠狠爱综合蜜芽五月 | 成熟女人毛片www免费版在线 | 2019年国产精品手机视频 | 国产精品毛片久久久久久久av | 韩国国内大量揄拍精品视频 | 麻豆短视频在线观看 | 国产视频一 | 91久久一区| 射精情感曰妓女色视频 | 国产999久久久 | 国产伦精品一区二区三区视频金莲 | 色综合图区 | 色天使在线视频 | 夜天干天干啦天干天天爽 | 国产精品人人做人人爽人人添 | 男人的天堂日韩 | 午夜18视频在线观看 | 久久久久久爱 | 日韩精品毛片无码一区到三区 | 亚洲最大色综合成人av | 国产污污| 日本最新免费二区 | 97久久久久久 | 久久综合久久88 | 亚洲精品毛片av一区二区三区 | 精品综合久久久久久888 | 亚洲国产精品无码久久久动漫 | 凸偷窥中国女人洗澡 | 天天操天天射天天爽 | 欧美特黄一级视频 | 亚洲欲| 精品性影院一区二区三区内射 | а√天堂资源国产精品 | 久久综合久久88中字幕文 | 成人h动漫精品一区二区器材 | 一性一交一摸一黄按摩精油视频 | 久久国产精品无码一区二区三区 | 久久精品无码中文字幕老司机 | 福利在线免费观看 | 亚洲丝袜在线观看 | 国产精品偷伦视频免费手机播放 | 四虎永久地址www成人久久 | 国产97免费视频 | 亚洲第一页综合 | 我要看www免费看插插视频 | av少妇 | 欧美综合自拍亚洲综合图 | av永久免费网站在线观看 | 国产99青青成人a在线 | 澳门黄色网 | 成人无码嫩草影院 | 人人妻人人妻人人片色av | 亚洲精品精华液一区二区 | 成人午夜高潮免费视频在线观看 | 国产成人精品福利网站 | 国产精品1区 | 99自拍视频 | 青青草手机视频在线观看 | 久久蜜桃av一区二区天堂 | 狼友av永久网站免费观看孕交 | 一天天影影综合网 | 久久亚洲精品11p | 免费观看亚洲 | 日韩乱码人妻无码中文字幕视频 | 亚洲国产成人无码电影 | 国产综合有码无码视频在线 | 亚洲伊人久久大香线蕉综合图片 | 久久99精品国产麻豆婷婷洗澡 | 素人fc2av清纯18岁 | 免费无码又爽又高潮视频 | 中文字幕在线观看91 | 亚洲欧美成αⅴ人在线观看 | 久久国产精品视频一区 | 欧美一级一区二区三区 | 精品久久久中文字幕 | 国精品无码人妻一区二区三区 | 无遮挡又黄又刺激又爽的视频 | 综合五月激情二区视频 | 少妇精品无码一区二区三区 | 久久久久久无码av成人影院 | 日韩精品视频观看 | 黑人与饥渴少妇在线 |